ISO 21149

De ISO 21149-norm, die testmethoden bevat voor het tellen en detecteren van aerobe mesofiele bacteriën in cosmetische producten, geeft twee verschillende richtlijnen:

- door het tellen van de kolonies op agarmedium na aerobe incubatie of
- controleren op afwezigheid van bacteriegroei na verrijking. door

Algemene methode onder ISO 21149-norm; Het omvat het tellen van kolonies op basis van de aan- of afwezigheid van bacteriegroei op een niet-selectief agarmedium of na verrijking.

Mogelijke remming van microbiële groei door het monster moet worden geneutraliseerd om detectie van levensvatbare micro-organismen mogelijk te maken. In elk geval en ongeacht de methode moet de neutralisatie van de antimicrobiële eigenschappen van het product worden gecontroleerd en bevestigd.

Een andere methode is “Plate Counting”
Plate counting bestaat uit de volgende stappen:
⎯ Bereiding van gegoten platen of uitstrijkjes met behulp van een specifieke cultuur medium en Inoculatie van de platen met een gedefinieerde hoeveelheid initiële suspensie of verdunning van het product.
⎯ Aërobe incubatie van de platen bij 32,5 °C ± 2,5 °C gedurende 72 uur ± 6 uur.
⎯ Aantal kolonies vormende eenheden (CFU) tellen en berekenen van het aantal aerobe mesofiele bacteriën per milliliter of gram product.

Derde methode “Membraanfiltratie”
Membraanfiltratie bestaat uit de volgende stappen:
⎯ Voeg een geschikte hoeveelheid van het gevalideerde monster toe aan een kleine hoeveelheid van geschikt steriel verdunningsmiddel. in het met water bevochtigde filterapparaat, laat het onmiddellijk weglopen en was het volgens de gevalideerde procedure (zie 13.3.4). Breng het membraanfilter over naar het oppervlak van het gespecificeerde agarmedium zoals gespecificeerd in ISO 21148.
⎯ Aërobe incubatie van membranen bij 32,5 °C ± 2,5 °C gedurende 72 uur ± 6 uur.
⎯ Kolonievormende eenheden Tellen van het aantal CFU's en berekenen van het aantal aërobe mesofiele bacteriën per milliliter of gram product.

De vierde methode is “Bacteriëndetectie door verrijking”
De bepaling van bacteriën door verrijking bestaat uit de volgende stappen:
⎯ 32,5 °C ± 2.5 Incubatie van een bepaalde hoeveelheid uitgangssuspensie gedurende ten minste 20 uur bij °C in een niet-selectief vloeibaar medium dat geschikte neutralisatoren en/of dispergeermiddelen bevat.
⎯ Overbrengen van een gespecificeerde hoeveelheid van de vorige suspensie op niet- selectief vast agarmedium.
⎯ Aërobe incubatie gedurende 48 uur tot 72 uur bij 32,5 °C ± 2,5 °C.
⎯ Detectie van groei van aërobe mesofiele bacteriën per S-monster van product en resultaten uitdrukken als "aanwezigheid /afwezigheid".